技术 | 家禽检测样本采集送检操作流程及注意事项-农兜网

时值冬春季节家禽疫病发生频繁，防疫压力增大，很多病原检测样本送检后，其检测的结果往往不能有针对性的指导家禽疫病防控。病原样本的采集、保存和运输直接影响着实验室的检测诊断结果的准确性，如何正确的送检病原样本是获取正确结果的关键，以下总结了几点注意事项，希望对广大的养殖者有所帮助。

一、病原样品采集

采样时机

当家禽突发异常，死亡增多时，多数养殖场开启治疗模式——抗生素应用，同时加强生物安全——消毒，处置得当及时，则平稳度过，但当治疗一段时间后，效果不理想，甚至死亡量增多时，就开启了检测模式——多方检测，这时就出现一个复杂问题——采样送检时机的延误。

家禽单发病已很少遇见，多是混感，若错过了最佳送检时机，检测结果是继发病原结果，对实际防治参考意义就不大了，如何能找到原发病才是关键！因此，病原样本采集时机才是关键，应尽可能在发病早期（发病3-4天以内最好）采集病原样本，采集具有大群代表性的濒死鸡或是凌晨新死亡鸡送检。例如有低致病性禽流感H9亚型病毒感染的鸡群，由于病毒毒力弱，部分家禽可自然耐过，但耐过后病毒就很难再检出，这也可能是鸡群原发病原之一，结果检测不到，也会干扰处置判断。

采样部位

病禽脏器采集部位同样关键，需要重点采集病原损伤严重的器官或病毒含量高的器官，这样可提高病原检出概率和准确性（后附具体样本采集列表）。病原采集应以鸡只个体为单位，根据检测目的一只鸡采集一套样本，最好使用封口袋单独分装样本，做到干净整洁，编号清晰。采集样本时，不同鸡只的组织器官不要混装，应避免交叉污染，以免干扰检测结果。若为雏禽或不便采样，也可整禽邮寄。需要用采样拭子采集样本的，例如咽喉拭子采集，应通过咽喉裂抵达喉头气管粘膜上，最好选择无菌的植绒采样拭子采集，以便病原物洗脱，减小检测干扰。

采样数量

发病场，单栋鸡舍可采集4只禽的病原样本为宜，病原检出即可定性判断。对于需要疾病净化或监测的种禽场，可通过采集拭子方法采样，采样数量可适当增大比例，亦可分阶段的全群采样。

安全注意事项

采样时，应注意采样人的个人安全防范，应佩戴护目镜、口罩、医用手套和防护服，避免抓伤及利器割伤。样本采集后，剖检场地应立即消毒处理，涉及的废弃物应做无害化处理，以免环境污染、交叉污染。

二、血清样品采集

血清采集

用注射器或采血针，采集活禽的血液3ml左右，注射器、采血管内必须解除真空状态，留出血清析出的空间，之后放置在4-8℃冰箱保鲜层内静置一宿，待血清析出。血清析出应不少于0.5毫升，分装后送检。采集时机应在疫苗加强免疫后3-4周为宜，单栋鸡舍随机采集检测样本（血清/蛋）应不少于20份。

三、保存运输

送检样本应低温保存，运输时间应小于四天。

1、病原样本送检时，检测样本应在冰箱内冷冻结实后，放置于保温泡沫箱中，加冰袋保持低温运输；需要做细菌分离或药敏试验的病原样本，禁止冷冻，应冷鲜运输，就近送检测。

2、抗体样本送检时，不能全血送检，因冷冻的血液样本中，破碎的红细胞会发生溶血现象，严重干扰检测结果；若是冷鲜的全血，在运输中也会发生溶血，尤其是夏季高温时节，全血更易发生腐败，最好分离血清，分装后冷冻运输。

3、包装箱口需用胶带密封保温，泡沫箱外加套纸箱，以免运输中泡沫箱箱体破损后失温和环境污染。

四、送检单的填写

对于送检的样本要详实填写送检登记单，包括但不限于以下项目：

1、送检场名称、地址、联系方式、养殖规模、饲养品种，采样日期、样品类别、样品数量及检测目的（检测项目）。

2、免疫情况、临床症状、发病史、治疗史、注意事项等。

3、送检单一式两份，采样场备案一份，另一份报送区域经理，执行送检流程。

注：详实的信息描述可有助于检测结果的正确分析，指导家禽生产及疫病诊疗。

哈尔滨维科生物技术有限公司就市场与技术服务部——中心检测实验室

哈兽维科公司市场与技术服务部中心检测实验室源自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，作为哈尔滨兽医研究所下属的国有高新技术企业，秉承严谨求实的科学态度和工作理念，积极投身于我国的养殖事业，能为现地广大的养殖群体提供精准有效的抗体、病原等检测服务，为养殖企业的家禽疫苗免疫和疫病防控诊断提供数据化支撑，同时中心实验室在国内布局了多个授权检测实验室（包括高校科研室和第三方检测机构），使之形成研究院所、中心实验室、授权检测实验室三级检测服务体系，最终搭建形成检测能力完善，检测力量雄厚，检测范围广泛，检测质量一流的三级检测服务网络，为养殖企业排忧解难，为动物健康保驾护航。

适用于家禽抗体、病原检测的方法有血凝抑制（HI）、酶联免疫吸附法（ELISA）、琼脂扩散（AGP）、病毒中和法（VN）、PCR、核酸序列测定、鸡胚接种分离病毒以及宏基因测序分析等。

表1 家禽常见病毒病及样品采集部位