百科知识-马流产沙门菌病的诊断


1.马流产沙门菌病的特征性临床症状是什么?

马流产沙门菌病主要引起怀孕马、驴中后期的流产,以及新生幼驹出现关节炎、囊肿、腹泻等副伤寒症状。

2.临床上马流产沙门菌病要注意与哪些疫病进行鉴别诊断?

马病毒性动脉炎和马鼻肺炎(马疱疹病毒1型)临床症状与马流产沙门菌病相似,均可以导致怀孕马、驴流产,需要进行实验室鉴别诊断。

3.马流产沙门氏菌病的“金标准”是什么?

马流产沙门菌病的金标准是细菌分离鉴定,分离到疑似沙门菌后,利用菌体抗原(O4,O12)和鞭毛特异性血清(H-e、n、x)进行凝集实验,出现肉眼可见的凝集现象时,即可以确诊马流产沙门菌感染。

4.马流产沙门菌病的实验室检测方法都有哪些?

病原学检测,除了“金标准”细菌分离鉴定外,还有常用的聚合酶链式反应(PCR),荧光定量PCR等、等温扩增等方法;血清学检测,主要包括试管凝集凝集、微量凝集、间接ELISA、竞争ELISA、马流产沙门菌胶体金检测卡、微球检测卡等。

5.马流产沙门菌的血清学检测有“金标准”吗?

没有马流产沙门菌抗体检测的“金标准”方法。目前的行业标准是上世纪80年代的提出的试管凝集实验。

6.目前国内外有商品化的血清学检测试剂盒吗?

国外没有商品化的马流产沙门菌血清学检测试剂盒。我国有由哈尔滨兽医研究所研发、哈尔滨国生生物生产的马流产沙门菌间接ELISA抗体检测试剂盒,马流产沙门菌竞争ELISA抗体检测试剂盒、马流产沙门菌胶体金抗体检测试剂盒等产品,具有良好的敏感性和特异性。

7.马流产沙门菌试管凝集有什么特点?

试管凝集实验是马流产沙门菌病血清学检测的行业标准。但存在以下不足:

(1)试管凝集试验的特异性较差:该凝集方法检测抗体时与其他沙门菌抗体存在交叉反应;

(2)试管凝集试验的敏感性较差:该凝集方法主要依赖于肉眼观察凝集程度,没有放大信号的参与,因此敏感性低。

(3)试管凝集试验的准确性较差:该凝集方法需要进行细菌计数和对标准血清的标定,不同操作者之间的平行性较差。

(4)试管凝集试验的检测通量低:对于30份样品,操作至少需要2h,反应时间需要20h以上,该凝集只能适用于少量样品的检测,不能实现样品的快速和高通量检测。

8.马流产沙门菌iELISA抗体检测试剂盒与试管凝集相比有什么优点?

马流产沙门菌iELISA采用体外表达马流产沙门菌特异性蛋白研制成功的抗体检测试剂盒,可用于马流产特异性抗体的检测。与试管凝集实验相比存在以下优点:

(1)特异性强:该试剂盒仅可以检测出马流产沙门菌特异性阳性血清,对于其他沙门菌和常见马传染病阳性血清检测均为阴性;

(2)敏感性高:高于试管凝集试验的检测敏感性;

(3)重复性:该试剂盒不同批次的组内、组间试验重复非常好;

(4)高通量:相对于试管凝集法,可以实现样品的高通量检测,效率更高。

9.马流产沙门氏菌竞争ELISA有什么优势?

该试剂盒同马流产沙门氏菌iELISA具有相同的优点:

(1)特异性强:该试剂盒仅可以检测出马流产沙门菌特异性阳性血清,对于其他沙门氏菌和常见马传染病阳性血清检测无交叉反应;

(2)敏感性高:高于试管凝集试验的检测敏感性;

(3)重复性:该试剂盒不同批次的组内、组间试验重复非常好;

(4)高通量:相对于试管凝集试验,可以实现样品的高通量检测,在反应时间上缩短40倍以上,使检测效率大大提高;

(5)与IELISA具有良好的符合率;

(6)操作简单,只需一步操作,作用30分钟即可显色读值,比iELISA更快。

10.    马流产沙门菌胶体金抗体检测卡有什么优点?

(1)特异性强:仅可以检测出马流产沙门菌特异性阳性血清,对于其他沙门菌和马传染病血清检测均为阴性。

(2)敏感性高:敏感性高于行业标准中的试管凝集试验。

(3)可操作性强:待检血清直接加入作用10min即可肉眼判定结果,不需要专业人士、不需要特殊仪,具有良好的操作性。

11.    开展马流产沙门菌病检测可选用什么检测方法?

马流产沙门菌间接ELISA和竞争ELISA方法均可用于检测马流产沙门菌的特异性抗体,适合大规模样品的筛查。

12.检测马流产沙门菌时,需要采集什么病料?有什么要求?

(1)对于流产的胎儿脏器(心、肝、脾、肺、肾),切下鸡蛋大小即可,装入干净的袋子中,各个脏器分开装,密封好,防止漏液

(2)采集动物阴道拭子,利用无污染的棉拭子采取阴道分泌物,装入干净的管子中,并加入1-2mL生理盐水。

(3)利用采血针,采取抗凝血和促凝血。

样品采集完毕后,冰袋冷藏运输送检。夏季炎热,组织冷冻后再邮寄,同时运输时多加冰袋。

13.    如何监测群体免疫后状况?

可以利用马流产沙门菌IELISA抗体检测方法对免疫后抗体水平进行评估。

14.    怎么制备血清样品?

将采血管在室温或37℃温箱倾斜放置1h,然后放4℃存在过夜,或者直接进行离心。转速1500-2000g离心5min,分离血清。

15.    普通实验室可以进行马流产沙门氏菌病的病原分离吗?

不可以。马流产沙门菌的分离需要二级实验室才能进行分离。

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