技术成果｜猪肺炎支原体实时荧光定量PCR检测试剂盒简介

【前言】

猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp）是诱发猪地方流行性肺炎的首要致病菌，长期给世界各地生猪养殖产业带来严重经济损耗。病猪典型临床表现为持续性干咳，无明显咳痰症状，染病猪群日均增重水平明显下滑，育肥阶段生猪个体长势参差不齐，出栏整齐度变差，大幅提升饲料消耗，直接影响猪场养殖效益。

猪肺炎支原体侵染机体后，往往是诱发猪呼吸道综合征的先导诱因，其会破坏猪呼吸道黏膜屏障，为猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、传染性胸膜肺炎放线杆菌等其他病原的继发感染或混合感染创造有利条件，进一步加重猪群病情，提升疫病防控难度。

【成果背景】

传统检测方法中，病原分离培养法耗时漫长，需数周才能得到结果，且对培养基要求严苛，易受其他杂菌污染，检出率偏低；血清学检测方法存在交叉反应问题，易出现假阳性结果，且无法区分既往感染与现有感染，难以满足临床精准诊断需求。这些传统检测手段的局限性，导致猪肺炎支原体感染难以实现早期发现、快速确诊，延误最佳防控时机，加剧疫病在猪群中的传播扩散。

实时荧光定量 PCR（qPCR）技术凭借其高灵敏度、高特异性、快速高效、可定量检测等优势，已成为病原微生物检测的主流技术。该技术可在扩增过程中实时监测荧光信号，通过Ct值精准判定病原存在及载量，能够有效区分Mhp与其他支原体、细菌等病原，避免交叉反应干扰，同时可实现对样本中Mhp核酸的绝对定量，为感染程度评估、防控效果监测提供可靠数据支撑。

基于此，研发猪肺炎支原体实时荧光定量 PCR 检测试剂盒，可弥补传统检测方法的不足，实现对Mhp的快速、精准、定量检测，为猪肺炎支原体的早期诊断、疫病防控、疫苗免疫效果评估及猪群净化工作提供重要技术支撑，对降低养猪业经济损失、推动生猪养殖产业健康可持续发展具有重要的现实意义。

 【成果应用】

猪肺炎支原体实时荧光定量 PCR 检测试剂盒，经临床样本及动物感染模型验证，该试剂盒能够显著缩短检测窗口期，可在 Mhp 感染早期精准检出病原，同时可实现病原载量的定量分析，为感染程度评估提供可靠依据。该试剂盒操作简便、稳定性强，适配临床常规检测设备，便于规模化推广应用。 

【产品优势】

1.灵敏度与特异性双优

依托优化的引物探针设计及反应体系，可精准识别 Mhp 靶标核酸，有效规避与其他支原体、细菌的交叉反应，大幅降低假阳性、假阴性概率；能检出极低浓度的病原，检测限101copies/反应，适配早期感染筛查需求。

图1 猪肺炎支原体荧光定量PCR检测方法特异性

图2 猪肺炎支原体荧光定量PCR检测方法敏感性

2.检测效率显著提升

无需繁琐的病原分离培养步骤，全程可在数小时内完成检测，相较于传统方法大幅缩短检测周期，同时可精准缩短检测窗口期，助力实现 Mhp 感染的早期确诊。

3.兼具定量检测能力

可通过荧光信号实时监测，精准定量样本中 Mhp 病原载量，为感染程度评估、防控效果监测提供量化依据。

4.操作便捷、适用性强

试剂盒组分经过优化配比，无需复杂实验操作，适配临床常规荧光定量 PCR 仪，稳定性与重复性良好，便于基层猪场及检测机构规模化推广应用。

5.针对性解决临床痛点

有效弥补传统检测方法的不足，为 Mhp 感染的早期筛查、动态监测及猪群净化提供高效可靠的技术支撑。