猪圆环病毒3型阳性率10%~60%,个别猪场达100%!

笔者按:猪圆环病毒3型(PCV3)是一种新发传染病,区别于猪圆环病毒2型(PCV2),二者在基因组结构和蛋白序列存在着显著差异。笔者近年来接触到多起PCV 3感染或混合感染导致猪群出现临床症状等问题。本文就PCV3的病原和致病力作一综述,便于广大养殖从业人员做好综合防控。

1.PCV3与PCV2的区别

首先需要明确,PCV3与PCV2只是基因组呈圆环状(见图1),所以依据这种特征都被命名为圆环病毒。但二者的基因组差异巨大,基因组同源率约为40%。PCV3基因组长2000bp,其主要免疫原性基因Cap基因长645bp;PCV2基因组长1767/1768bp,其主要免疫原性基因Cap基因长701bp,二者Cap基因同源率39%~41%,属于不同蛋白,因此猪免疫了PCV2疫苗不能阻止PCV3的感染和繁殖。

图1 PCV3阅读框与猪圆环病毒1型(PCV1)、PCV2之间的差异

2. PCV3的流行现状

基于PCV3 全基因组序列或者存在两个氨基酸突变(A24V 和 R27K)的 PCV3 Cap 蛋白氨基酸序列构建的系统发育树可以将 PCV3 划分为PCV3a、PCV3b 和 PCV3c 3 种基因型,其中 PCV3a又可划分为 PCV3a-1、PCV3a-2和 PCV3a-IM 3种基因亚型。Qi 等基于来自中国 21 个省份的 51 株PCV3 的研究发现,PCV3a、PCV3b 和 PCV3c 所占的比例分别为 29.4%、41.2% 和 29.4%,可见 PCV3b占比最高,推测其可能成为中国最主要的流行株;PCV3a 主要流行于中原地区,PCV3b 主要流行于东北地区,PCV3c 则广泛分布于我国北部、东北、中原、东部、西南和南部等 6 个地区。此外,目前美国只发现了PCV3a 和 PCV3c 两个亚型,且美国的 PCV3a与我国的 PCV3a 处于相同的进化分支。

PCV3的检出率近几年呈急剧增长趋势,在信得科技集团猪病检测中心一季度送检的病料中,检出率高达16.3%。在很多回顾性监测以及大范围流调的过程中,检测率更高。根据不同的报道,圆环病毒在全球都有检出报道, PCV3 很可能早就在全球猪群中流行了。 Ye 等对 1993 —2007 年在瑞典采集的猪临床样本进行了 PCV3 检测,阳性率高达 20.4%,且最早的阳性样本可以追溯到 1993 年;Sun 等对1990 — 1999 年在中国采集的猪临床样本进行了PCV3 检测,发现阳性率为 6.5%,最早的阳性样本可以追溯到 1996 年;Rodrigues 等对 1967 —2018年在巴西采集的样本进行 PCV3 检测,发现其阳性率高达 40%。 此外,西班牙的一项流行病学调查表明,自 1996 年以来,PCV3 一直在该国猪群中流行。PCV3 在亚洲、欧洲、美洲等多个国家的猪群中广泛流行,且有较高的流行率。 研究表明,德国猪群PCV3 的流行率为 75%,波兰猪群的流行率为 86%(见图2)。

图2 自2016开始PCV3在全世界的感染情况(数据来源:Molly Kroeger,Five years of porcine circovirus 3: What have we learned about the clinical

disease, immune pathogenesis, and diagnosis)

中国猪群的流行率为PCV3 的阳性率介于10%~60%,个别猪场达到 100%,且自 2015 年后也呈上升趋势(见图3)。

图3 PCV3在中国目前检出情况(数据来源:Zhuo Ha,Molecular detection and genomic

characterization of porcine circovirus 3 in

pigs from Northeast China)

3.PCV3的易感动物

PCV3的宿主广泛,猪是其主要宿主,可感染各阶段的猪只,尤其是妊娠母猪与仔猪;研究发现在出现腹泻、呼吸道症状等疾病的猪群身上,相较于健康猪只或轻症的猪只,更容易分离到病毒。也有报道在狗、牛、野猪等动物体内有病毒检出,而且猪场中蚊子带毒量与猪只带毒量呈正相关(图4)。

图4 不同动物之间病毒可进行相互传播(数据来源:Ting Ouyang,Recent progress on porcine circovirus type 3)

4.PCV3的传播途径

可水平传播,也可以垂直传播,病猪和隐性感染猪是主要传染源。

水平传播:感染猪的鼻液、粪便、唾液等排出体外,污染运输设备、衣服、饮水和饲料等周边环境,并经消化道、呼吸道途径感染其他健康猪。

垂直传播:可在母乳以及流产胎儿中检出。在公猪的精液中也可检出。

5.PCV3感染引起的危害

根据现有研究与报道总结,当前整体情况是高感染率、低死亡率。很多猪场呈现隐性感染的状态。但会与其他病毒混感,加重病情,也会导致继发细菌性疾病的发生。

(1)对母猪的危害

被感染的母猪表现为厌食、皮肤变色、多灶性丘疹、斑点和皮炎等症状,同时其生殖机能与受孕率也呈下降趋势,不同周龄的孕胎均可发生流产,严重时可导致猪急性死亡。

(2)对仔猪的危害

心肌炎导致急性死亡;呈现机体多器官系统功能紊乱、先天性震颤;感染仔猪出现体重下降,咳嗽、腹泻,继而严重的呼吸频率增多、嗜睡、耳朵和皮肤干燥发红,丘疹、震颤等相关症状。

(3)对育肥猪的危害

育肥猪感染后症状不明显,厌食,个别发烧、丘疹、咳喘等症状。

(4)破坏免疫系统

PCV3 可逃避宿主的天然免疫系统反应,入侵机体并造成损伤。 PCV3 的感染可引起猪各组织器官的炎性病变,进而导致淋巴细胞发育不良和坏死,造成免疫系统的破坏。

(5)感染方式

混合感染是圆环病毒感染的主要方式。研究发现,PCV3可以和多种病毒共感染,包括PCV1、PCV2、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(猪蓝耳病毒,PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪细环病毒(PTTSuV)、猪星状病毒 4 型(PAstV4)、轮 状 病 毒 A 型(RotavirusA)、猪巨细胞病毒(PCMV)和猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)等。其中,PCV3 和 PCV2 是最常见的混合感染。

6.PCV3的防控

(1)PCV3的检测

PCV3引起的猪只症状不明显,单纯依靠经验从临床判断很困难,因此就需要结合实验室的抗原检测来进行确诊,对样本中 PCV3 的检测方法包括聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光定量 PCR(qPCR)、原位杂交技术(ISH)、免疫组织化学技术(IHC)、间接酶联免疫吸附实验(ELISA)、间接免疫荧光(IFA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等。

信得科技集团旗下子公司的信达基因也研发自己专利的抗原和抗体检测试剂盒来配套为猪场进行服务。其中抗原检测试剂盒可用于检测PCV3的核酸,可以进行PCV2和PCV3的鉴别诊断。抗体检测试剂盒,可用于评估猪场的感染比例和状态。如表1检测数据,两个猪场通过抗体检测发现,感染率都比较高,但2场的抗体均值比1场显著增高,2场在临床上的表现也更加严重。同时对其他病原进行检测发现,2场混合感染了PRRSV,PCV3的致病力也显著增强。

表1 两个猪场的PCV3抗体检测结果

(2)PCV3的生物安全防控

与PCV2类似,PCV3是非囊膜病毒,对消毒剂和外界环境的抵抗力很强。常见消毒剂很难杀灭该病毒。此外PCV3的宿主广泛,通过人流、物流和车流传播途径多样,因此很难切断其传播途径。

(3)PCV3疫苗研发

自2015年开始,信得科技集团研发中心开展了PCV3疫苗的研制工作,目前在亚单位疫苗和二联疫苗上已取得喜人的进展。

1)PCV3亚单位疫苗:PCV3培养困难,制作全病毒疫苗现阶段较为困难。因此,更多的精力在通过大肠杆菌或者杆状病毒进行培养,来制作PCV3的CAP蛋白亚单位疫苗。

2)圆环病毒多价苗:在临床中会发现,PCV2与PCV3混感的情况较多,二者协同会加重彼此的致病力,因此研发二联苗进行免疫,也是很好的防控这两种病原协同混感的措施。

总结:PCV3进入大众的视线比较晚,但在非洲猪瘟暴发后,全国范围内的种群调动,也致其快速扩散。PCV3的致病力、传播途径和免疫抑制病的特点与PCV2类似,其影响和危害也日渐显现,希望广大养殖业从业人员引起重视。有关PCV3的诊断试剂和防控问题,也欢迎读者来电咨询(本文作者:信得科技家畜市场技术部 苏圣华)。

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