猪流行性腹泻病毒(PEDV)无针皮内接种效果观察

题目:猪流行性腹泻病毒(PEDV)无针皮内接种效果观察

摘要:为预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染哺乳仔猪腹泻,猪流行性腹泻(PED)疫苗主要通过肌内注射(IM)或口服途径接种。我们发现,通过皮内(ID)途径接种灭活PEDV疫苗的生长猪比未接种的猪只有更高的中和抗体滴度和细胞因子(IFN-、IL-4和IL-10)水平。此外,哺乳仔猪在妊娠母猪皮内(ID)接种PED疫苗后获得乳源性免疫。我们通过这一途径评估了疫苗接种的有效性,以及随后对强毒PEDV的保护。在攻毒后6d,皮内(ID)接种组和对照(无疫苗)组哺乳仔猪的存活率分别为70%和0%。剖检发现,与对照组相比,皮内(ID)接种母猪的乳源性免疫仔猪十二指肠和回肠的绒毛长度显著增加(p<0.05)。因此,通过皮内(ID)途径接种灭活PED疫苗可以部分保护PEDV的感染。

图1:皮内接种到颈部。(A)Pulse 250(无针注射系统)皮内注射机皮。(B)接种后1小时和(C)接种后3天注射部位的照片。

图2:皮内接种PED疫苗后血清中和抗体滴度和细胞因子水平的变化。(A)注射三种佐剂后抗体滴度的变化。MontanideTM IMS 1313 VGN、MontanideTM GEL 01 PR、Carbopol 940聚合物佐剂分别用方形、菱形和圆形表示。对照组用三角形表示。通过ID(皮内)途径接种灭活PED疫苗和Carbopol 940聚合物佐剂后,(B)IFN-、(C)IL-4和(D)IL-10浓度的变化。皮内注射和对照(无疫苗)分别用灰色条形图和白色条形图表示。

注释:Serum neutralization value:血清中和值

Relative quantities (RQ):相对数量

Days of post vaccination:免疫接种后天数

表1:NA(中和抗体)滴度、IgA比值、妊娠母猪生产成绩。

注释:

Group:组别

Sow:母猪

Period of Pregnancy (no. of Piglets):妊娠阶段

No. of Live Piglets:产活仔数

No. of Dead Piglets:产死胎数量

No. of Abortions:流程数量

Clinical Signs:临床症状

NA Titer (log2):中和抗体滴度

Delivery:分娩

Colostrum:初乳

IgA ELISA (O.D. Value) for Colostrum:初乳中IgA抗体

图3:仔猪接种PEDV强毒株后的临床评分及体重。(A)临床评分和(B)体重变化。经皮内接种PED疫苗和Carbopol 940聚合物佐剂的母猪(nos.ID1、ID2、ID3和ID4)和对照组(nos.MO1、MO2和MO3)的仔猪分别用蓝线和黑线表示。

注释:Clinical scores:临床评分

Piglets weight:仔猪重

Days post challeng:攻毒后天数

图4:仔猪接种PEDV强毒株后的存活率、血清中和抗体效价和RNA拷贝数。(A)存活率、(B)血清中和抗体滴度的变化、(C)PEDV RNA拷贝数。母猪所产仔猪(ID1、ID2、ID3和ID4)皮内注射PED疫苗+Carbopol940聚合物佐剂,对照组(MO1、MO2、MO3),分别用蓝线和黑线表示。

注释:

survival %:存活率

Days post challeng:攻毒后天数

serum neutralizing antibody titers:血清中和抗体效价

necropsy day:剖检

piglets fecal PEDV RNA copy number:仔猪粪便PEDV RNA拷贝数

图5:仔猪接种PEDV强毒株后小肠绒毛高度和长度。(A)十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度和隐窝深度,(B)绒毛高度与隐窝深度(VH/CD值)。

注释:

Duodenum:十二指肠

Jejunum:空肠

ileum:回肠

villus height crypt depth (VH/CD ratio):绒毛高度与隐窝深度

图6:仔猪(未接种疫苗的母猪)接种PEDV强毒株后,(A)十二指肠、(B)空肠、(C)回肠的绒毛和隐窝形态发生变化。仔猪(ID(皮内)接种PED疫苗母猪)接种PEDV强毒株后,(D)十二指肠、(E)空肠、(F)回肠的绒毛和隐窝。

注释:

piglets of mock sow:未接种疫苗母猪所产仔猪

Piglets of ID sow:接种疫苗母猪所产仔猪

Duodenum:十二指肠

Jejunum:空肠

ileum:回肠

表2:细胞因子特异性引物和探针序列

注释:

Cytokine:细胞因子

Specific Primer Sets:特异性引物

Probe:探针

Length (bp):长度

Reference:参考文献

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